您現(xiàn)在的位置:中國(guó)農(nóng)業(yè)儀器網(wǎng) > 技術(shù)文章 > 蛋白質(zhì)測(cè)定方法的比較
蛋白質(zhì)測(cè)定方法的比較
蛋白質(zhì)的定量,是生物化學(xué)中最常用、最基本的分析方法之一。目前常用的有以下幾種方法:定氮法、紫外吸收法、Lowry法(Folin-酚試劑法)、Bradford法(考馬斯亮藍(lán)法)、BCA法等:
定氮法比較繁復(fù),但較準(zhǔn)確,往往以定氮法測(cè)定的蛋白質(zhì)作為其他方法的標(biāo)準(zhǔn)蛋白。
紫外吸收法簡(jiǎn)便、靈敏、快速,不消耗樣品,測(cè)定后樣品仍能回收利用。缺點(diǎn)是準(zhǔn)確度較差,干擾物質(zhì)多,用標(biāo)準(zhǔn)曲線法測(cè)定蛋白質(zhì)含量時(shí),對(duì)于那些與標(biāo)準(zhǔn)蛋白中酪氨酸和色氨酸含量差異大的蛋白質(zhì),有一定的誤差。
Lowry法是較早發(fā)展的一種靈敏的檢測(cè)方法,最低靈敏度為5微克,通常測(cè)定范圍20-250微克。優(yōu)點(diǎn)是靈敏度高,缺點(diǎn)是費(fèi)時(shí)較長(zhǎng),要精確控制操作時(shí)間,標(biāo)準(zhǔn)曲線不是嚴(yán)格的直線形式,且專一性差,干擾物質(zhì)較多。
Bradford法是靈敏度更高的一種方法,優(yōu)點(diǎn)有:靈敏度高,比lowry法高4倍左右,最低檢測(cè)達(dá)1-5微克;測(cè)定快速、簡(jiǎn)便,染色穩(wěn)定;干擾物質(zhì)少。確點(diǎn)是用于不同蛋白質(zhì)測(cè)定時(shí)有較大的偏差;仍有干擾,如SDS、去污劑、Triton x100等;標(biāo)準(zhǔn)曲線有輕微的非線性。
- 【中國(guó)農(nóng)業(yè)儀器網(wǎng)】聲明部分文章轉(zhuǎn)載自其它媒體,轉(zhuǎn)載目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé),且不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)和其它問(wèn)題,請(qǐng)?jiān)?0日內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系。