在ISO/IEC17025《校準和檢測實驗室能力的通用要求》中明確指出實驗室出具的檢測報告應包含有關(guān)評定校準或測試結(jié)果的不確定度說明,故對測量結(jié)果進行不確定度的評定成為檢測實驗室的重要內(nèi)容。本文試食品中蛋白質(zhì)檢測項目的檢測結(jié)果作不確定度評定。

原理;含氮的有機化合物,與硫酸一同加熱消化,使蛋白質(zhì)分解，分解的氨與硫酸結(jié)合生成硫酸銨,然后堿化蒸餾使氨游離，用硼酸吸收后再以鹽酸標準溶液滴定,根據(jù)酸的消耗量乘以換算系數(shù)即為蛋白質(zhì)含量。

建立數(shù)學模型

1.1 鹽酸標準溶液的相對標準不確定度u(CHCL)/CHCL 的分析鹽酸標準溶液的不確定度來自三方面：第一,標定鹽酸用基準無機碳酸鈉純度為100%± 0.05%,按均勻分布轉(zhuǎn)換成標準偏差為0.0005/ √ 3=0.00029,u(p)/p=2.9 × 10-4。第二，基準稱量的變動性,在50g 以內(nèi)稱量的變動性通過10 次重復測定統(tǒng)計,標準偏差為0.05mg，天平校正產(chǎn)生的不確定度,按檢驗證書給定的± 0.1mg,在置信概率95%(k=1.96)時，換算成標準偏差為0.1/1.96=0.051，即u ( m’) / m ’= 5 . 4 × 1 0 -4。第三，5 0 m L 滴定管的不確定度按檢驗證書給定的± 0.04mL,按均勻分布換算標準偏差為0.04/ √ 3=0.023mL，充滿液體至滴定管刻度的變動性通過重復6次測定統(tǒng)計，標準偏差為0.012mL，滴定管與溶液溫度校正時溫度不同引起的體積不確定度，假設差為2℃，對水體積膨脹系數(shù)為2.1 × 10-4/℃,則95% 置信概率(k=1.96)時體積變化的區(qū)間為± 50 × 2 × 2.1 × 10-4= ± 0.021 mL,轉(zhuǎn)換成標偏差為0.021/1.96=0.011。u(V50)/V50=5.6 × 10-4。根據(jù)以上三項得出的鹽酸標準溶液的相對標準不確定度為：

1.2 樣品稱量的標準不確定度u(m)的分析稱量不確定度來自兩方面。第一，稱量的變動性在50g 以內(nèi)，稱量的變動性通過10次重復測定統(tǒng)計，標準偏差為0.05mg。第二，天平校正產(chǎn)生的不確定度，按檢驗證書給定的± 0.1mg,在置信概率95%(k=196)時，換算成標準偏差為:0.1/1.96=0.051,此兩項得出稱量的不確定度為：

1.3 100mL 消化瓶體積的標準不確定度u(V100)的分析

100mL 消化瓶的不確定度來自三個方面,第一，消化瓶體積的不確定度，按檢驗證書給定為± 0.12 mL,按照均勻分布換算成標準偏差為0.12/ √ 3=0.069mL。第二,充滿液體至消化瓶刻度的變動性通過6 次重復測定統(tǒng)計,標準偏差為0.019mL。第三,消化瓶和溶液的溫度與校正溫度不同而引起的體積不確定度，假設為2℃,對水體積膨脹系數(shù)為2.1× 10-4/℃，則95% 置信概率(k=1.96)時體積變化區(qū)間為± 100 × 2 × 2.1 × 10-4= ± 0.042mL,轉(zhuǎn)換成標準偏差為0.042/1.96=0.021mL,該三項得出的不確定度為:

1.4 20mL 移液管的標準不確定度u(V20)的分析

20mL 移液管的標準不確定度來源為：第一，移液管體積的不確定度，按檢驗證書給定為± 0.03mL,按均勻分布換算標準偏差為0.03/ √ 3=0.017mL;第二,充滿液體至移液管刻度的變動性,通過重復6次測定統(tǒng)計,標準偏差為0.012mL;第三,移液管和溶液的溫度與校正時的溫度不同引起的體積不確定度，假設差為2℃，對水體積膨脹系數(shù)為2.1 × 10-4/℃,則95% 置信概率(k=1.96)時體積變化的區(qū)間為± 20 × 2 × 2.1 × 10-4= ± 0.008mL,轉(zhuǎn)換成標準偏差為0.008/1.96=0.004mL,以上三項合成得出的不確定度為：

1.5 樣品扣除試劑空白(V1-V0)消耗鹽酸標準溶液的不確定度u(V10)的分析

用鹽酸標準溶液滴定樣品和試劑空白是在10mL 滴定管中進行的。10mL 滴定管的標準不確定度來源為：第一，滴定管體積的不確定度，按檢定證書給定為± 0.02mL，按均勻分布換算成標準偏差為0.02/ √ 3=0.012mL。第二，充滿液體至滴定管刻度的變動性，通過重復6 次測定統(tǒng)計, 標準偏差為0 . 0 1 0m L 。第三，滴定管和溶液的溫度與校正溫度不同引起的體積變化的不確定度，假設差為2℃，對水體積膨脹系數(shù)為2.1 × 10-4/℃，則95% 置信概率(k=1.96)時體積變化的區(qū)間為± 10 × 2 × 2.1 × 10-4=0.004mL，換算成標準偏差為0.004/1.96=0.002mL,以上三項合成得出的不確定度為：

樣品( 大豆粉)測得蛋白質(zhì)含量為N=44.32g/100g,則u(N)=44.32 × 0.0023=0.10g/100g。當然，測定大豆蛋白質(zhì)含量也有十分簡便的方法，即直接用儀器測定，如粗蛋白測定儀就是一款測定蛋白質(zhì)的儀器，采用了電熱蒸汽發(fā)生器，能夠連續(xù)不斷地進行微量和常量蒸餾。含8孔數(shù)顯型消化爐。

2 擴展不確定度分析

取包含因子k=2(95% 置信概率),則U(N)=2 × u(N)=2 × 0.10=0.20g/100g。

3 最后結(jié)果表示

N=N ± U(N)=(44.32 ± 0.20)g/100g。