您現(xiàn)在的位置:中國(guó)農(nóng)業(yè)儀器網(wǎng) > 技術(shù)文章 > 粗脂肪測(cè)定的兩種方法比較
粗脂肪測(cè)定的兩種方法比較
來(lái)源: 本站 類別:技術(shù)文章 更新時(shí)間:2010-06-09 閱讀次
粗脂肪是指飼料、動(dòng)物組織、動(dòng)物排泄物中脂溶性物質(zhì)的總稱。粗脂肪與脂肪概念不同,它涵蓋的內(nèi)容要遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于脂肪。通常粗脂肪的測(cè)定,有抽提法和酸水解法,當(dāng)然,現(xiàn)在還有更為方便的途徑,那就是直接用粗脂肪測(cè)定儀,它有多種型號(hào),如SZF-06B粗脂肪測(cè)定儀,SZF-06粗脂肪測(cè)定儀和SZF-06A粗脂肪測(cè)定儀。
下面我們來(lái)具體看下抽提法和酸水解法測(cè)定粗脂肪的原理、試劑儀器等相異之處。
原理:
抽提法:本法為重量法,用脂肪溶劑將脂肪提出后進(jìn)行稱量,該法適用于固體和液體樣品。通常將樣品浸于脂肪溶劑,為乙醚或沸點(diǎn)30℃至60℃的石油醚,借助于索氏提取器進(jìn)行循環(huán)抽提。用本法提取的脂肪性物質(zhì)為脂肪類物質(zhì)的混合物,其中含有脂肪游離脂肪酸、磷脂酯、固醇、芳香油某些色素及有機(jī)酸等。因此,稱為粗脂肪。
酸水解法:樣品經(jīng)酸水解后用乙醚提取,除去溶劑即得游離及結(jié)合脂肪總量。
試劑和儀器:
抽提法:無(wú)水乙醚、海砂、索氏提取器、恒溫水浴鍋、烘箱、脫脂棉花、脫脂濾紙
酸水解法:鹽酸、95%乙醇、乙醚、石油醚、100毫升具塞刻度量筒
操作步驟:
抽提法:(一)樣品的準(zhǔn)備
稱取樣品的重量根據(jù)材料中脂肪的含量而定,通常脂肪含量在10%以下的,稱取樣品10-12克;脂肪含量為50-60%的,則稱取樣品2-4克,(可以用測(cè)定水分后的樣品)。
將樣品在80-100℃烘箱去水分。一般烘4小時(shí),烘干時(shí)要避免過(guò)熱。冷卻后,準(zhǔn)確地稱取一定量樣品,必要時(shí),拌以精制海砂,無(wú)損地移入濾紙筒內(nèi),用脫脂棉塞嚴(yán),將濾紙筒放人索氏提取器的提取管內(nèi),注意勿使濾紙筒高于提取管的虹吸部分。
(二)抽取
將洗凈的提取瓶在1.5℃烘箱內(nèi)烘干至恒重,加乙醚約達(dá)到提取瓶容積的1/2-2/3,然后將提取器各部分按圖連接,注意不能漏氣。
加熱提取時(shí),應(yīng)在電熱恒溫水浴中進(jìn)行(水浴溫度約為40-50℃)也可以使用燈泡或電爐加熱的水浴鍋,嚴(yán)禁用火焰直接加熱索氏提取器。
在加熱時(shí)乙醚蒸發(fā),乙醚蒸汽由連接管上升至冷凝器,凝結(jié)成液體滴入提取管中,此時(shí)樣品內(nèi)的脂肪為乙醚液面超過(guò)虹吸管高度后溶有脂肪的乙醚虹吸管流入提取瓶,為此循環(huán)抽提,調(diào)解水域溫度,使乙醚每小時(shí)循環(huán)3-5次,提出時(shí)間視樣品的性質(zhì)而定,一般需6-12小時(shí),樣品含有脂肪是否提取完全,可以用濾紙來(lái)粗略判斷,從提取管內(nèi)吸取少量的乙醚并滴在凈的濾紙上,待乙醚干后,濾紙上不留有油脂的半點(diǎn)則表示已經(jīng)提取完全。
提取完全后,再將乙醚蒸到提取管內(nèi),待乙醚液面達(dá)到虹吸管的最高處以前,取下提取管。
(三)稱重和計(jì)算
將提取瓶中的乙醚全部蒸干,洗凈外壁,置于105℃烘箱干燥至恒重,按下式計(jì)算樣品的促脂肪百分含量。
脂肪(﹪)=( W1-W0)/W×100
W1:接受瓶和脂肪重量(克)。
W:樣品重量(克)。
W0:接受瓶重量(克)。
酸水解法:1、樣品處理: (1)固體樣品:精密稱取約2克水,混勻后再加重。毫升鹽酸。置于50毫升大試管內(nèi),加8毫升;(2)液體樣品:稱取10.0克,置于50毫升大試管內(nèi),加工0毫升鹽酸,
2、將試管放70-80℃水浴中,每隔5-10分鐘以玻璃棒攪拌一次,至樣品消化完全為止,約40-50分鐘。
3、取出試管,加人10毫升乙醇,混合。冷卻后將混合物移于100毫升具塞量筒中,以25毫升乙醚分次洗試管,一并倒人量筒中。待乙醚全部倒入量筒后,加塞振搖1分鐘,小心開(kāi)塞,放出氣體,再塞好。靜置12分鐘,小心開(kāi)塞,并用石油醚-乙醚等量混合液沖洗塞及筒口附著的脂肪。靜置10-20分鐘,待上部液體清晰,吸出上清液于已恒重的錐形瓶?jī)?nèi),再加5毫升乙醚于具塞量筒內(nèi),振搖,靜置后,仍將上層乙醚吸出,放入原錐形瓶?jī)?nèi)。將錐形瓶置水浴上蒸干,置95-105℃烘箱中干燥2小時(shí),取出放入干燥器內(nèi)冷卻0.5小時(shí)后稱重。
計(jì)算:
X=(m1-m0)/m2
X:樣品中脂肪的含量%;
m1:接受瓶與脂肪的質(zhì)量,g;
m2:接受瓶的質(zhì)量,g。
- 【中國(guó)農(nóng)業(yè)儀器網(wǎng)】聲明部分文章轉(zhuǎn)載自其它媒體,轉(zhuǎn)載目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé),且不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)和其它問(wèn)題,請(qǐng)?jiān)?0日內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系。
推薦儀器
最近更新儀器
相關(guān)技術(shù)文章