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玉米葉綠素含量的快速測定

來源: http://www.gge6.com/  類別:技術文章  更新時間:2013-05-29  閱讀次

      葉綠素是植物葉片光合作用的主要光合色素,必不可少。葉綠素含量的測定是實驗室的重要項目之一,如采用化學方法Arnon法,分光光度計法,葉綠素含量測定儀等,不一而足。迄今為止,在實際應用中,我們通常采用葉綠素含量測定儀,因為其方便快捷,而且精確度高,方便攜帶。受到廣泛農(nóng)業(yè)工作者、科研院所的青睞。
      分光光度計法測定結(jié)果準確可靠,但是在測定時需要損傷葉片和組織,不利于對植株的系統(tǒng)研究。葉色值反映了植物葉片的綠色程度,與葉綠素含量存在一定的相關性。葉綠素含量測定儀是一種專門用于測定植物葉綠素含量的儀器,該儀器有多家廠商生產(chǎn)銷售,其中以日本柯尼卡美能達公司的SPAD-502最為高端和暢銷。托普儀器作為日本柯尼卡美能達公司的特約一級代理商,也提供葉綠素含量測定儀的銷售工作。葉綠素測量儀的測定原理是:測量葉子在紅色區(qū)域和近紅外區(qū)域的吸收率。通過這兩部分區(qū)域的吸收率,來計算出一種SPAD值,它是用數(shù)字來表示目前和葉子中葉綠素含量相對應的參數(shù)。因為葉綠素在藍色區(qū)域(400—500nm)和紅色區(qū)域(600—700nm)范圍內(nèi)吸收達到了峰值,但在近紅外區(qū)域卻沒有吸收。另外,葉綠素含量測定儀還具有反應氮元素含量的作用。
      玉米葉綠素含量的測定有兩種方法。葉綠素含量測定儀法:利用日本產(chǎn)的SPAD-502葉綠素含量測定儀于花期對玉米功能葉片中部進行活體測定。每個材料取3個葉片,最后求平均值。分光光度計法:將葉綠素含量測定儀法測定完的葉片取回進行分光光度計法測定。用毛刷刷去表面雜質(zhì),用水沖洗,擦干,備用。每個葉片在中部用直徑9 mm打孔器打孔,取6個圓形葉片,稱重后放于15 mL試管,用10 mL95%乙醇避光浸泡96 h,浸泡過程中每天混勻2次,葉片完全變白后進行比色,于665、649、470 nm波長測量光密度值,計算葉綠素含量,取3個葉片的平均值作為該材料的含量值。計算公式為:CA=13.95D665-6.88D649;CB=24.96D649-7.32D665;C其它=(1000D470-2.05CA-114.8CB)/245。

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