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淀粉酶法與鹽酸水解旋光法的比較
淀粉酶法與鹽酸水解旋光法的比較
淀粉是由結(jié)構(gòu)不同的直鏈淀粉和支鏈淀粉組成的高分子碳水化合物,它是人體能量和營養(yǎng)物質(zhì)的主要來源。其中有專門的直鏈淀粉測(cè)定儀,用于測(cè)定直鏈淀粉含量。隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,玉米深加工生產(chǎn)出的玉米淀粉已被廣泛應(yīng)用于食品、藥品和輕工業(yè)的生產(chǎn)原料。因而,如何快速準(zhǔn)確地測(cè)定玉米中淀粉的含量,提高其經(jīng)濟(jì)價(jià)值和食用品質(zhì),對(duì)合理使用玉米及其副產(chǎn)品、選育良種、科學(xué)儲(chǔ)糧具有十分重要的意義。
淀粉酶法與鹽酸水解旋光法的比較:
原理:前者為試樣經(jīng)除去脂肪及可溶性糖類后,其中α-淀粉經(jīng)淀粉酶水解成雙糖,雙糖再用鹽酸水解成具有還原性的單糖,最后按還原糖測(cè)定,并折算成淀粉。后者為淀粉在在稀稀鹽酸的作用下水解,然后用旋光儀測(cè)定水解液的旋光度,求出淀粉含量。
檢驗(yàn)方法:前者為稱取2.00g~5.00g(過40目)試樣置于放有折疊濾紙的漏斗內(nèi),先用50ml乙醚分五次洗滌去除脂肪,再用約100ml乙醚洗滌除去可溶性糖類,將殘留物移入250ml燒杯內(nèi)并用50ml水洗滌濾紙和漏斗,洗液并入燒杯內(nèi)。將燒杯置沸水浴中加熱15min,使淀粉糊化,然后放置冷卻至60℃以下,加20mlα-淀粉酶溶液,在恒溫水浴鍋中55℃~60℃保溫水解1h,并經(jīng)常攪拌。取酶解液1滴加1滴碘溶液應(yīng)不顯藍(lán)色,若顯藍(lán)色,再加熱糊化并加20mlα-淀粉酶溶液,繼續(xù)保溫,直至加碘不顯藍(lán)色為止。加熱至沸騰,冷卻后移入250ml容量瓶中并加水定容至刻度,混均、過濾。棄去初濾液。取50ml濾液,置于250ml錐形瓶中,加5ml鹽酸,裝上回流冷凝管,在沸水浴中回流1h。冷卻后加2滴甲基紅指示液,用氫氧化鈉溶液中和至中性,溶液轉(zhuǎn)入100ml容量瓶中,洗滌錐形瓶,洗液并入100ml容量瓶,加水定容至刻度,混均備用。用處理好的試樣按GB/T5009.7操作,測(cè)定還原糖含量,同時(shí)量取50ml水及與試樣處理時(shí)相同量的。后者為稱取5.00g(過40目)的試樣于250ml錐形瓶加25ml1%鹽酸溶液混合均勻,再加入25ml1%鹽酸溶液,并浸入到沸騰的水浴中15min(不停地?cái)嚢?~5min),水解完成后加入30ml溫水,將錐形瓶置于冷水浴中冷卻,然后加入5.0ml10%磷鎢酸溶液,并轉(zhuǎn)移至100ml容量瓶中,用水洗滌錐形瓶一并轉(zhuǎn)入容量瓶中,用水稀釋至刻度,靜止后過濾(棄去初液10~15ml)。
測(cè)定過程:前者為α-淀粉酶溶液,按同樣方法作試劑空白試驗(yàn)。后者為取濾液注入長為1分米或2分分米米的的旋旋光光管管中,測(cè)定其旋光度。按同樣方法作試劑空白試驗(yàn)。
測(cè)定時(shí)間:前者為①樣品經(jīng)除去脂肪和可溶性糖后糊化15min。②加淀粉酶水解1h,直至酶解完全為止。③加酸繼續(xù)冷凝回流1h。后者為加鹽酸水解15min。
另外,測(cè)定淀粉含量,還有相應(yīng)的儀器,如直鏈淀粉分析儀,它能夠測(cè)定大米、玉米、小麥等農(nóng)作物中淀粉含量。
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