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通過(guò)桑果組培研究植物組培技術(shù)
來(lái)源: 類別:技術(shù)文章 更新時(shí)間:2013-01-19 閱讀次
桑樹(shù)是多年生木本植物,屬于落葉樹(shù)種,主要分布于溫帶和亞熱帶地區(qū)。我國(guó)果桑主要分布在江蘇、廣東、廣西、湖北、陜西等地。但規(guī)模都不大,一般每個(gè)種植地不超過(guò)33 hm²畝。現(xiàn)有果桑品種十幾個(gè)。從遺傳方面來(lái)講,有二倍體(2n)、三倍體(3n)、四倍體(4n)。產(chǎn)量2 250 kg/ hm² , 7 500~11 250 kg/ hm²、30 000 kg/ hm²。桑苗繁殖的方法很多,大體上分為有性繁殖和無(wú)性繁殖兩大類。
嫁接法、扦插法,一是速度慢,二是質(zhì)量差,不能脫毒,且易感病毒病。近20余年,隨著生物技術(shù)的不斷完善和提高,利用組織培養(yǎng)快速繁殖并產(chǎn)生大量脫毒苗,以解決某些植物的退化,提高果實(shí)產(chǎn)量和質(zhì)量,應(yīng)用于生產(chǎn),為加速培養(yǎng)桑樹(shù)優(yōu)良品種開(kāi)辟出新途徑。果桑不但桑果產(chǎn)量高、而且桑葉的質(zhì)量、產(chǎn)量與湖桑(普通養(yǎng)蠶用桑樹(shù))相當(dāng)。因此既可發(fā)展養(yǎng)蠶業(yè),又可收獲桑果。鮮桑果可以直接供應(yīng)市場(chǎng),也可加工成桑果汁、桑果醬、釀成桑果酒,制成桑仁糕,還可以提煉食用色素、醫(yī)用黃酮等醫(yī)藥產(chǎn)品。香港雜志把果桑稱謂第三代流行果品之一。
1 材料和方法
1. 1 材料的選擇和處理
取健壯枝條的頂芽或側(cè)芽,剪除葉片,用無(wú)菌水擦洗干凈,在無(wú)菌條件下,用0.1%的升汞溶液浸泡消毒10min,無(wú)菌水沖洗3~4次,將處理過(guò)的組織放入組培培養(yǎng)室中開(kāi)始培養(yǎng)。
1.2 接種
在無(wú)菌條件下,將頂芽或側(cè)芽切成3~5mm長(zhǎng)的段,剝?nèi)デo尖外部鱗片和小葉,接種到培養(yǎng)基上,每瓶接5~7段。
1. 3 培養(yǎng)
將頂芽或莖段,接種在MS + 0.5mg/L BA + 0. lmg/L NAA + 0. lmg/L GA培養(yǎng)基中培養(yǎng),附加3%蔗糖,用0.5%瓊脂固化。在溫度25℃左右和光照下,5d后長(zhǎng)出單生芽,4周后小芽長(zhǎng)到1 cm并產(chǎn)生叢生苗。
將叢生苗分割接種在MS + 2mg/L BA + 0.5mg/L GA培養(yǎng)基中,附加蔗糖3% ,0.5%瓊脂固化。
經(jīng)培養(yǎng)小苗長(zhǎng)到3~5cm高時(shí),可以從節(jié)間處,將其切成小段進(jìn)行繼代培養(yǎng),側(cè)芽萌動(dòng),迅速生長(zhǎng)。1個(gè)月可長(zhǎng)到3~5cm高,繼代培養(yǎng)可使側(cè)芽苗不斷增殖,從而獲得大量可供繁殖的試管苗。
切下帶頂芽的苗,插在1/2MS+1mg/L GA + 2%蔗糖的培養(yǎng)基上培養(yǎng)。約4、5周后,在自然光照下,生根發(fā)育成完整植株,供移栽。
3 結(jié)果與討論
本材料為雙子葉植物,在培養(yǎng)過(guò)程中,我們發(fā)現(xiàn)在莖段的切口特別是基部切口上會(huì)長(zhǎng)出類似愈傷組織的褐化物,且不斷膨大,直至將底部包圍。這樣從頂芽開(kāi)始逐漸枯黃、萎縮,造成培養(yǎng)失效。因此,建議在培養(yǎng)基中加入適量的活性炭等吸收劑吸附部分褐化物質(zhì),也可用頻繁轉(zhuǎn)移到新鮮培養(yǎng)基上或用切除褐化組織的方法加以防止,有一定效果。
嫁接法、扦插法,一是速度慢,二是質(zhì)量差,不能脫毒,且易感病毒病。近20余年,隨著生物技術(shù)的不斷完善和提高,利用組織培養(yǎng)快速繁殖并產(chǎn)生大量脫毒苗,以解決某些植物的退化,提高果實(shí)產(chǎn)量和質(zhì)量,應(yīng)用于生產(chǎn),為加速培養(yǎng)桑樹(shù)優(yōu)良品種開(kāi)辟出新途徑。果桑不但桑果產(chǎn)量高、而且桑葉的質(zhì)量、產(chǎn)量與湖桑(普通養(yǎng)蠶用桑樹(shù))相當(dāng)。因此既可發(fā)展養(yǎng)蠶業(yè),又可收獲桑果。鮮桑果可以直接供應(yīng)市場(chǎng),也可加工成桑果汁、桑果醬、釀成桑果酒,制成桑仁糕,還可以提煉食用色素、醫(yī)用黃酮等醫(yī)藥產(chǎn)品。香港雜志把果桑稱謂第三代流行果品之一。
1 材料和方法
1. 1 材料的選擇和處理
取健壯枝條的頂芽或側(cè)芽,剪除葉片,用無(wú)菌水擦洗干凈,在無(wú)菌條件下,用0.1%的升汞溶液浸泡消毒10min,無(wú)菌水沖洗3~4次,將處理過(guò)的組織放入組培培養(yǎng)室中開(kāi)始培養(yǎng)。
1.2 接種
在無(wú)菌條件下,將頂芽或側(cè)芽切成3~5mm長(zhǎng)的段,剝?nèi)デo尖外部鱗片和小葉,接種到培養(yǎng)基上,每瓶接5~7段。
1. 3 培養(yǎng)
將頂芽或莖段,接種在MS + 0.5mg/L BA + 0. lmg/L NAA + 0. lmg/L GA培養(yǎng)基中培養(yǎng),附加3%蔗糖,用0.5%瓊脂固化。在溫度25℃左右和光照下,5d后長(zhǎng)出單生芽,4周后小芽長(zhǎng)到1 cm并產(chǎn)生叢生苗。
將叢生苗分割接種在MS + 2mg/L BA + 0.5mg/L GA培養(yǎng)基中,附加蔗糖3% ,0.5%瓊脂固化。
經(jīng)培養(yǎng)小苗長(zhǎng)到3~5cm高時(shí),可以從節(jié)間處,將其切成小段進(jìn)行繼代培養(yǎng),側(cè)芽萌動(dòng),迅速生長(zhǎng)。1個(gè)月可長(zhǎng)到3~5cm高,繼代培養(yǎng)可使側(cè)芽苗不斷增殖,從而獲得大量可供繁殖的試管苗。
切下帶頂芽的苗,插在1/2MS+1mg/L GA + 2%蔗糖的培養(yǎng)基上培養(yǎng)。約4、5周后,在自然光照下,生根發(fā)育成完整植株,供移栽。
3 結(jié)果與討論
本材料為雙子葉植物,在培養(yǎng)過(guò)程中,我們發(fā)現(xiàn)在莖段的切口特別是基部切口上會(huì)長(zhǎng)出類似愈傷組織的褐化物,且不斷膨大,直至將底部包圍。這樣從頂芽開(kāi)始逐漸枯黃、萎縮,造成培養(yǎng)失效。因此,建議在培養(yǎng)基中加入適量的活性炭等吸收劑吸附部分褐化物質(zhì),也可用頻繁轉(zhuǎn)移到新鮮培養(yǎng)基上或用切除褐化組織的方法加以防止,有一定效果。
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