3我國玉米DNA指紋庫構(gòu)建情況與應用前景

吳渝生等從96對SSR引物中篩選出24對多態(tài)性豐富的引物，建立了云南省大面積推廣的3個玉米雜交種及其親本的DNA指紋圖譜。在此基礎(chǔ)上結(jié)合統(tǒng)計學方法，將各雜交系的指紋圖譜以“0”、“l”型數(shù)據(jù)描述，將指紋圖譜數(shù)字化，使得指紋圖譜分析簡化明了。趙久然等從158個SSR引物中篩選出10個核心引物，建立了60個玉米自交系的指紋圖譜。核心引物要求PIC值(多態(tài)信息含量)高，重復性好，核心引物的使用大大減少了引物合成及篩選的工作量，達到省時高效的要求。李小輝等僅用二三個篩選出的核心引物就區(qū)分了13個玉米雜交種。譚君等利用6對核心引物區(qū)分73份供試玉米自交系，建立了西南地區(qū)常用玉米自交系的DNA指紋圖譜。

關(guān)于我國玉米DNA指紋庫的構(gòu)建，王鳳格(2005)系統(tǒng)地提出了在構(gòu)建之前和構(gòu)建過程中需要解決的幾個重要問題。其中：(1)選用品種材料要具有代表性、完備性、開放性、實用性等特點；(2)選用標記方法，即本文的SSR技術(shù)；(3)SSR技術(shù)體系的優(yōu)化：即從DNA提取、PCR擴增及電泳檢測等環(huán)節(jié)對SSR技術(shù)進行了全面優(yōu)化；(4)選用哪些SSR引物，即核心引物的確定，是指多態(tài)性、穩(wěn)定性和重復性等綜合特性好并可作為初步研究優(yōu)先選用的一套引物。

玉米新品種DNA指紋庫的建立將成為一個平臺，為玉米多個領(lǐng)域提供豐富的有價值的信息。首先，通過對玉米品種DNA指紋多態(tài)性的分析，可以對國內(nèi)玉米品種資源的遺傳多樣性作出總體評價。其次，通過將待檢品種與DNA指紋庫的品種指紋進行比對，獲得品種純度和真?zhèn)涡畔ⅲ�避免了以前那種針對一個或少數(shù)幾個品種進行大量引物篩選的工作。還可應用于國家區(qū)試玉米品種的質(zhì)量監(jiān)控，國家區(qū)試品種是未來國家推廣品種的主要來源，保證了這些品種的質(zhì)量就等于從源頭上解決了玉米品種的質(zhì)量問題。此外，在玉米新品種保護工作中，可以代替形態(tài)鑒定進行品種特異性、一致性和穩(wěn)定性測試(即DUS測試)，從而大大縮短DUS測試的時間。最后，該技術(shù)還可應用于玉米品種侵權(quán)案的司法鑒定，為有效地維護玉米育種者的品種權(quán)益提供強有力的工具。

4結(jié)束語

玉米基因組較其它禾谷類作物的基因組比較大，重復序列所占比重也較大。近年來，人們對重復區(qū)段長度多樣性、存在狀態(tài)的變化及其在細胞中的功能及性能進行探索和研究，豐富了分子生物學理論，在玉米遺傳研究中得到快速應用，日見顯示出優(yōu)越性。目前，玉米上已經(jīng)公布的SSR引物序列已達2000多對，而且每隔一段時間就有新的引物增加，而各個科研單位已經(jīng)開始著手ESI、SSR的開發(fā)利用，作為一種以SSR多態(tài)性高為基礎(chǔ)的標記，其應用范圍將日益擴大。此外，作為繼RFLP的第二代分子標記,SSR這種分子標記已取得了一定的成果，并展現(xiàn)出廣闊的應用前景，如SSR在基因表達和染色體的組織化中的作用，玉米體外雄性單性生殖誘導的候選基因的鑒定等。