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葉斑病菌孢子在人工氣候培養(yǎng)箱中的培育研究
膠胞炭疽菌引起的芒果炭疽病是嚴(yán)重影響芒果產(chǎn)量和質(zhì)量的重要病害之一。葉斑類植物病害葉部病斑的擴(kuò)展是寄主、病原物和環(huán)境三者共同作用的結(jié)果,體現(xiàn)了病害嚴(yán)重性程度,病斑擴(kuò)展快反映了病害危害程度大,病害擴(kuò)展慢則反映了病害危害程度小。影響病斑擴(kuò)展的因素有多個(gè)方面,包括品種抗病性、有效積溫、溫度、相對(duì)濕度、礦質(zhì)元素和土壤肥力等因素,不同因素對(duì)不同病斑擴(kuò)展的影響已有研究。病害大面積的暴發(fā)流行與適宜的發(fā)病環(huán)境是分不開(kāi)的,充分研究發(fā)病因素對(duì)病害發(fā)展的影響是科學(xué)管理植物病害的前提條件。少有芒果炭疽病病斑擴(kuò)展影響因素的研究報(bào)道。通過(guò)離體葉片接種法研究了接種體分生孢子濃度、芒果抗病性、溫度、相對(duì)濕度和光照等因素對(duì)芒果炭疽病病斑擴(kuò)展的影響,旨在揭示影響芒果炭疽病病斑擴(kuò)展的主要因素,了解芒果炭疽病發(fā)生發(fā)展規(guī)律。人工氣候培養(yǎng)箱在研究過(guò)程中發(fā)揮重要的作用。
選取大小一致的芒果淡綠色葉片5片,在葉片背而選取3個(gè)側(cè)脈與側(cè)脈之間的葉肉部位應(yīng)用束針刺傷葉片,接種分生抱子懸浮液10},L,濃度為4x105個(gè)/mL。以清水處理為對(duì)照。放置于280C,100%濕度保濕、黑暗條件的人工氣候培養(yǎng)箱中培養(yǎng),采用十字交叉法測(cè)量病斑直徑。病原菌分生抱子濃度對(duì)病斑擴(kuò)展的影響采用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法將供試分生抱子懸浮液配置成4x10',4x106,4x105,4x104,4x10;,4x102個(gè)//mL共6個(gè)濃度梯度。采用離體葉片接種法,接種48,72,96h后測(cè)量病斑直徑。每個(gè)處理重復(fù)15次,所有數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析均采用DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)進(jìn)行Duncan多重新復(fù)極差法分析。設(shè)置全光照(日光燈,15W),12h黑暗++12h光照(日光燈,15W)和全黑暗共3種光照條件。采用離體葉片接種法,分生抱子濃度4x105個(gè)/mL。將葉片置于不同光照條件下,28℃人工氣候培養(yǎng)箱中培養(yǎng),葉片與光源的垂直距離為30,100%濕度保濕,96,120,144h后測(cè)量病斑的直徑,進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
利用人工氣候培養(yǎng)箱綜合分析孢子濃度對(duì)病斑擴(kuò)展影響數(shù)據(jù)表明,不同濃度分生孢子在成功侵染并達(dá)到顯癥后,病斑擴(kuò)展速度較為一致,48~72h時(shí)病斑的平均擴(kuò)展速度為4.4mm/24h,而7296h時(shí)病斑的平均擴(kuò)展速度為6.0mm/24h,這說(shuō)明隨時(shí)間增加病斑的擴(kuò)展速度有加快趨勢(shì)。4xlOZ個(gè)/mL接種點(diǎn)接種量10},L,故所接種的分生抱子個(gè)數(shù)約為4個(gè),體現(xiàn)了該病菌高致病力特性。田間調(diào)查發(fā)現(xiàn)在芒果開(kāi)花結(jié)果及抽出嫩葉之前,越冬落葉、枯枝、葉片及枝條已存在大量菌源,因此,接種體數(shù)量是影響病斑擴(kuò)展的次要因素之一。
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