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車載式孢子捕捉器對梨黑斑病孢子的捕捉
梨黑斑病是梨種植區(qū)廣泛發(fā)生的一種世界性病害,是梨三大病害之一,該病由梨鏈格孢菌引起。病原菌主要侵染香梨葉片、新梢和果實。果實成熟期時在果實表面形成近圓形或不規(guī)則的黑褐色病斑,中間凹陷,潮濕時病斑表面產生黑色霉層,嚴重影響果實的產量和品質?稍诨ㄆ诤凸麑嵃l(fā)育期經各種途徑侵入而潛伏至貯藏期發(fā)病,是一種典型的潛伏侵染性病害。庫爾勒香梨是新疆傳統(tǒng)的特色優(yōu)勢梨品種,為當?shù)亓止a業(yè)帶來較大的經濟效益。車載式孢子捕捉器對病菌孢子的捕捉十分有效,對其進行研究有著十分重要的取樣作用。
梨黑斑病菌以分生孢子及菌絲體在病枝梢、病芽、病果上越冬,次年春從病組織上產生新的分生孢子,靠風雨傳播。當孢子萌發(fā)后,通過梨樹皮孔、氣孔侵入或直接穿透寄主表皮侵入,引起初次侵染。然后在梨樹整個生育期可多次產生新孢子進行侵染危害,形成重復侵染。目前國內外對該病在果園空氣中的分生孢子傳播及其發(fā)病規(guī)律和動態(tài)監(jiān)測尚無研究。
將涂有凡士林的載玻片分別置于兩個香梨果園的車載式孢子捕捉器中,每周采樣2次,分別做好玻片編號和記錄,帶回實驗室,于生物顯微鏡下觀察計數(shù)及記錄。從花序伸出期至落花期,在供試果園中的孢子捕捉器周圍選8棵樹作為觀測點,每周采集兩次梨花,每次隨機采集梨花25朵并作編號記錄。取其中15朵花進行分離培養(yǎng),無菌操作下用0.25%次氯酸鈉表面消毒45s,無菌水清洗3次,置于滅菌PCA培養(yǎng)基平皿中,25℃培養(yǎng)5~7d,純化長出的目標菌落,鏡檢觀察及鑒定。用DNA提取試劑盒提取另10朵花的DNA,加50μL無菌水洗脫2次。用核酸蛋白分析儀檢測樣品DNA的純度和濃度,并進行PCR鑒定。
通過車載式孢子捕捉器在出口果園不同時期捕捉香梨黑斑病菌孢子并且對花和果實中的該病菌進行檢測并監(jiān)測,查明了該病菌孢子在果園的消長過程。明確了病害發(fā)生期和發(fā)病嚴重度與果園孢子量和氣象因素等之間的關系,為香梨黑斑病的果園防治提供依據(jù)。
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