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農(nóng)藥殘留速測(cè)的三種方法
來(lái)源： 類(lèi)別：技術(shù)文章 更新時(shí)間：2013-11-20 閱讀次
農(nóng)藥殘留速測(cè)技術(shù)酶抑制法是利用有機(jī)磷農(nóng)藥的毒理特性建立的一種快速檢測(cè)農(nóng)藥殘留的方法。在一定條件下，有機(jī)磷農(nóng)藥對(duì)某些酷酶催化水解的正常功能有一定的抑制作用，其抑制率的大小與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)。這些酷酶包括：各種動(dòng)物來(lái)源的乙酞膽堿酷酶和丁酞膽堿酷酶以及從某些植物中提取的植物酷酶。讓酶與樣本萃取液或溶液進(jìn)行反應(yīng)，如果樣本中沒(méi)有農(nóng)藥殘留或者殘留量極少，酶的活性就不被抑制，水解反應(yīng)不受影響；反之如果農(nóng)藥殘留量較高，酶的活性就會(huì)被農(nóng)藥抑制，再通過(guò)檢測(cè)一些特定的顏色，pH值或者電流等的變化，從而達(dá)到檢測(cè)有機(jī)磷農(nóng)藥的目的。酶抑制法主要包括比色法、速測(cè)卡（片）法和生物傳感器法等。
1.化學(xué)速測(cè)法（速測(cè)靈法）
化學(xué)速測(cè)法主要是根據(jù)有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥的氧化還原特性進(jìn)行測(cè)定的一類(lèi)快速檢測(cè)方法。有機(jī)磷農(nóng)藥（磷酸酷、二硫代酸酷、磷酸胺）在金屬催化劑作用下水解為磷酸及醇等，水解產(chǎn)物和檢測(cè)液反應(yīng)使檢測(cè)液的紫紅色褪去變成無(wú)色。該方法的缺點(diǎn)是僅局限于有機(jī)磷農(nóng)藥，靈敏度不高，易受一些還原性物質(zhì)的干擾；優(yōu)點(diǎn)是避免了用酶的不穩(wěn)定性，操作簡(jiǎn)便、價(jià)格便宜、檢測(cè)速度快，通過(guò)進(jìn)一步改善試劑性能，規(guī)范測(cè)定技術(shù)，可提高檢測(cè)的靈敏度和準(zhǔn)確性，從而為當(dāng)前廣大城鄉(xiāng)農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)和銷(xiāo)售者所青睞。
2.比色法
比色法是酶抑制法農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)測(cè)定技術(shù)中最常采用的一種方法，也是最簡(jiǎn)單的一種測(cè)定技術(shù)。通過(guò)酶水解底物碘化硫代乙酞膽堿生成的碘化硫代膽堿，能與5,5一二硫代一2,2一二硝基苯甲酸（DINB）作用，生成5一琉基一2一硝基苯甲酸（黃色）。在特征波長(zhǎng)（420.0nm）下進(jìn)行比色，測(cè)定吸光值，根據(jù)吸光值在一定時(shí)間內(nèi)改變程度的大小，計(jì)算乙酸膽堿酷酶被抑制的程度，并通過(guò)與農(nóng)藥濃度進(jìn)行回歸分析，建立回歸方程，從而通過(guò)測(cè)定未知樣品對(duì)酶活性的抑制率求出樣品中殘留農(nóng)藥的量的一種方法。利用此方法對(duì)蔬菜、果品及農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留量進(jìn)行測(cè)定，靈敏度高、操作簡(jiǎn)便、檢驗(yàn)速度快，可檢測(cè)多種農(nóng)藥的綜合殘留量。目前，國(guó)內(nèi)大多數(shù)農(nóng)藥殘留速測(cè)儀都是利用顏色的變化（吸光度）原理研究設(shè)計(jì)。不同公司研制的儀器大同小異，只是有的用乙酸膽堿酷酶，有的用丁酞膽堿酷酶，在酶和底物應(yīng)用方面存在差異，從而判定抑制率也存在差異。
3.速測(cè)卡法
速測(cè)卡法又稱(chēng)酶片法。是將乙酞膽堿酷酶或其他類(lèi)似的酶和乙酞膽堿類(lèi)似物靛酚乙酸酷，分別固化后加載在濾紙上，形成一個(gè)小卡片故稱(chēng)速測(cè)卡。這種簡(jiǎn)單的載體技術(shù)的應(yīng)用，可以達(dá)到便于攜帶和現(xiàn)場(chǎng)操作的目的。自1985年美國(guó)科學(xué)家發(fā)明酶片技術(shù)以來(lái)，我國(guó)學(xué)者也進(jìn)行了大量的研究，并開(kāi)發(fā)出了配套的農(nóng)藥殘留速測(cè)箱技術(shù)，箱內(nèi)配備有自制的酶片、顯色劑及底物片以及所需的全部器皿和試劑，不需要貴重儀器沒(méi)備和專(zhuān)業(yè)技術(shù)操作人員，可在田間直接使用，借助顏色反應(yīng)直接給出是否有農(nóng)藥殘留的信息。
1.化學(xué)速測(cè)法（速測(cè)靈法）
化學(xué)速測(cè)法主要是根據(jù)有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥的氧化還原特性進(jìn)行測(cè)定的一類(lèi)快速檢測(cè)方法。有機(jī)磷農(nóng)藥（磷酸酷、二硫代酸酷、磷酸胺）在金屬催化劑作用下水解為磷酸及醇等，水解產(chǎn)物和檢測(cè)液反應(yīng)使檢測(cè)液的紫紅色褪去變成無(wú)色。該方法的缺點(diǎn)是僅局限于有機(jī)磷農(nóng)藥，靈敏度不高，易受一些還原性物質(zhì)的干擾；優(yōu)點(diǎn)是避免了用酶的不穩(wěn)定性，操作簡(jiǎn)便、價(jià)格便宜、檢測(cè)速度快，通過(guò)進(jìn)一步改善試劑性能，規(guī)范測(cè)定技術(shù)，可提高檢測(cè)的靈敏度和準(zhǔn)確性，從而為當(dāng)前廣大城鄉(xiāng)農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)和銷(xiāo)售者所青睞。
2.比色法
比色法是酶抑制法農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)測(cè)定技術(shù)中最常采用的一種方法，也是最簡(jiǎn)單的一種測(cè)定技術(shù)。通過(guò)酶水解底物碘化硫代乙酞膽堿生成的碘化硫代膽堿，能與5,5一二硫代一2,2一二硝基苯甲酸（DINB）作用，生成5一琉基一2一硝基苯甲酸（黃色）。在特征波長(zhǎng)（420.0nm）下進(jìn)行比色，測(cè)定吸光值，根據(jù)吸光值在一定時(shí)間內(nèi)改變程度的大小，計(jì)算乙酸膽堿酷酶被抑制的程度，并通過(guò)與農(nóng)藥濃度進(jìn)行回歸分析，建立回歸方程，從而通過(guò)測(cè)定未知樣品對(duì)酶活性的抑制率求出樣品中殘留農(nóng)藥的量的一種方法。利用此方法對(duì)蔬菜、果品及農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留量進(jìn)行測(cè)定，靈敏度高、操作簡(jiǎn)便、檢驗(yàn)速度快，可檢測(cè)多種農(nóng)藥的綜合殘留量。目前，國(guó)內(nèi)大多數(shù)農(nóng)藥殘留速測(cè)儀都是利用顏色的變化（吸光度）原理研究設(shè)計(jì)。不同公司研制的儀器大同小異，只是有的用乙酸膽堿酷酶，有的用丁酞膽堿酷酶，在酶和底物應(yīng)用方面存在差異，從而判定抑制率也存在差異。
3.速測(cè)卡法
速測(cè)卡法又稱(chēng)酶片法。是將乙酞膽堿酷酶或其他類(lèi)似的酶和乙酞膽堿類(lèi)似物靛酚乙酸酷，分別固化后加載在濾紙上，形成一個(gè)小卡片故稱(chēng)速測(cè)卡。這種簡(jiǎn)單的載體技術(shù)的應(yīng)用，可以達(dá)到便于攜帶和現(xiàn)場(chǎng)操作的目的。自1985年美國(guó)科學(xué)家發(fā)明酶片技術(shù)以來(lái)，我國(guó)學(xué)者也進(jìn)行了大量的研究，并開(kāi)發(fā)出了配套的農(nóng)藥殘留速測(cè)箱技術(shù)，箱內(nèi)配備有自制的酶片、顯色劑及底物片以及所需的全部器皿和試劑，不需要貴重儀器沒(méi)備和專(zhuān)業(yè)技術(shù)操作人員，可在田間直接使用，借助顏色反應(yīng)直接給出是否有農(nóng)藥殘留的信息。
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