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組培培養(yǎng)室對(duì)紫色馬鈴薯組織培養(yǎng)研究
花青素有預(yù)防心腦血管疾病、抑制腫瘤細(xì)胞發(fā)生等多種生理功能,紫色馬鈴薯中含有大量的該物質(zhì),而紫色馬鈴薯屬于無(wú)性繁殖作物,在栽培過(guò)程中易受病毒浸染而種性退化,由于種薯攜帶病毒,病害發(fā)生嚴(yán)重,會(huì)導(dǎo)致減產(chǎn)10%~30%,嚴(yán)重的70%以上。通過(guò)莖尖脫毒組培無(wú)菌馬鈴薯植株能長(zhǎng)期保存優(yōu)良品種的生產(chǎn)潛力,建立一系列的組培快繁體系可為生產(chǎn)提供優(yōu)良高產(chǎn)種薯。利用組培培養(yǎng)室進(jìn)行培養(yǎng)研究。
馬鈴薯塊莖通過(guò)自然休眠或用l%硫脲+5毫克/升赤霉素浸種5分鐘以打破休眠。破除休眠后的塊莖用消毒后濕潤(rùn)的細(xì)砂覆埋,待薯塊頂芽長(zhǎng)到3~4厘米時(shí),將其在36℃的高溫下預(yù)處理,使病毒鈍化。然后,切取頂端2~3厘米的壯芽,去掉所有葉片,用自來(lái)水充分洗凈,將其放在燒杯里,上面蓋好紗布連續(xù)沖洗30分鐘。在超凈工作臺(tái)上用70%的酒精浸泡30秒,用無(wú)菌水清洗1次,再用0.1%HgCl2消毒5~8分鐘,最后用無(wú)菌水清洗5次后置于封閉的無(wú)菌瓶中備用。一次消毒的芽不能太多,以免消毒后材料放置時(shí)間太長(zhǎng),莖尖發(fā)生褐變,影響成活率。
在超凈工作臺(tái)上,放在40倍的雙筒解剖顯微鏡下用解剖刀小心除去莖尖周圍的小葉片,再用解剖針去掉葉原基,直至露出頂端圓滑的生長(zhǎng)點(diǎn),小心切取所需的莖尖分生組織,最后只保留生長(zhǎng)點(diǎn)大小為0.1~0.2毫米。切取下來(lái)后接種到馬鈴薯莖尖培養(yǎng)基上,以切面接觸瓊脂,每個(gè)試管接種1個(gè)莖尖,封嚴(yán)瓶口置于組培培養(yǎng)室中進(jìn)行離體培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶以15厘米×2厘米的試管為宜,每管裝有10毫升培養(yǎng)基。接種后,在試管上端外面的紙帽上標(biāo)注接種的品種和接種的日期。
組培培養(yǎng)室對(duì)處理過(guò)的馬鈴薯進(jìn)行培養(yǎng)觀察,發(fā)現(xiàn)經(jīng)過(guò)莖尖脫毒、組培快繁、脫毒微型薯的誘導(dǎo),原種、良種繁育,直至大田生產(chǎn)商品薯。將莖尖脫毒技術(shù)和高效留種技術(shù)相結(jié)合,并建立科學(xué)合理的良種繁育體系,是大幅度提高紫色馬鈴薯產(chǎn)量和質(zhì)量的最佳途徑。
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