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全自動凱氏定氮儀測定蛋白質含量的優(yōu)勢
凱氏定氮法有半微量和自動之分,半微量凱氏定氮法的操作相對比較繁瑣,自動的方式工作效率比較高。凱氏定氮法包括消化、蒸餾、滴定、結果計算等步驟,3種國標凱氏定氮法測定蛋白質含量檢驗方法。全自動凱氏定氮儀法可以根據(jù)檢驗方法的需要進行測定條件設置,相對于半微量凱氏定氮法更易滿足準確性、重復性要求,在檢測樣品量較大時,還能較大提高工作效率。
反應溫度過低會造成樣品消化不完全,導致檢測結果偏低;反應溫度過高更易造成分解樣品含氮量損失,也會嚴重導致檢測結果偏低。對同一份大豆樣品,分別采用自動凱氏定氮儀法、半微量凱氏定氮法及不規(guī)范的半微量凱氏定氮法(試樣消化時操作不規(guī)范,使用2kW電爐不墊石棉網(wǎng),直接加熱凱氏定氮瓶,試樣消化溫度過高時),同時進行5平行比對試驗。
采用全自動凱氏定氮儀測定大豆蛋白質含量自動化程度高,標準偏差最小,重復性好;使用凱氏定氮法測定蛋白質,用2kW電爐不墊石棉網(wǎng),直接加熱導致消化溫度過高時,氮損失較多,測定值約為實際值的30%~60%。在樣品消化過程中要特別注意規(guī)范操作,控制火力的大小,否則會導致氮的流失,導致蛋白質測定值的嚴重偏低。建議最好采用自動凱氏定氮儀進行消化處理樣品,通過檢查試驗測定N-乙酰胺或色氨酸的回收率達到相應的要求,來確定儀器條件的設置,保證測定結果的準確性、重復性。若使用電爐進行人工消解,一定要控制好反應溫度,加熱時墊上石棉網(wǎng),保證受熱均勻,并同時做好檢查試驗。
在使用全自動凱氏定氮儀測定蛋白質含量,可有效防止消化、蒸餾等過程中由于人為誤操作對實驗結果造成影響,保證了檢測結果的準確性以及可靠性。嚴格按照操作規(guī)范及檢驗方法要求操作,在樣品消化過程中注意控制反應溫度,可以減少檢驗結果的誤差。
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